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PEG化纳米金制备方法及表征图谱

时间:2016-08-05 11:07:24       浏览:9144

金纳米颗粒进行表面修饰在生物(wù)领域应用(yòng)是非常重要的,不仅可(kě)以提高其稳定性,而且使其表面功能(néng)化,能(néng)更轻易的与抗體(tǐ)、酶等生物(wù)分(fēn)子连接起来。常用(yòng)含巯基配體(tǐ)对纳米金进行修饰,谷肌甘肤(GSH) ,巯基丙酸(MPA),半肌氨酸(cysteine),肌胺(cystamine),二巯基辛酸(DHLA)及聚乙二醇(PEG)等,其中最常见的是巯基聚乙二醇(PEG-SH),主要有(yǒu)以下几个原因:1.PEG為(wèi)高分(fēn)子聚合物(wù),将PEG修饰到纳米金颗粒上,纳米金胶體(tǐ)的稳定方式会由原来的静電(diàn)稳定变為(wèi)空间稳定,稳定状态不易受外界因素的影响;2.PEG无抗原和致免疫性、无毒、生物(wù)相容性较好;3.PEG在生理(lǐ)环境中对生物(wù)分(fēn)子没有(yǒu)吸附或其他(tā)相互作用(yòng),有(yǒu)效减少了非特异性蛋白的吸附,延長(cháng)了循环时间;4.采用(yòng)端基不同的PEG,其一段连接在金纳米颗粒上,另一端的活性基团可(kě)以进行其他(tā)修饰,使纳米金颗粒表面性质多(duō)样化。


PEG化纳米金的制备方法:

金属纳米粒子的主要制备方法有(yǒu)物(wù)理(lǐ)法和化學(xué)法,其中物(wù)理(lǐ)法主要有(yǒu)真空蒸镀法、软着陆法、電(diàn)分(fēn)散法和激光消融法等,化學(xué)法主要有(yǒu)氧化还原法、電(diàn)化學(xué)法、晶种法、微乳液法、相转移法、模板法。

氧化还原法:该法通常是在含有(yǒu)高价金离子的溶液中加入还原剂,金离子被还原而聚集成纳米粒子。所用(yòng)的还原剂包括经典的柠檬酸三钠、硼氢化钠、磷、十六烷基苯胺、聚乙二醇、聚苯胺等。其中以柠檬酸钠还原法最為(wèi)经典,就是以柠檬酸三钠為(wèi)还原剂在热的水溶液中将[AuCl4]-还原,其制备方法简单,所得到的颗粒性质稳定。

 

微乳液法:该法是将表面活性剂溶解在有(yǒu)机溶剂中,当表面活性剂的浓度超过临界胶束浓度(CMC)后形成亲水极性头向内、疏水有(yǒu)机链向外的液體(tǐ)颗粒结构,其内核可(kě)增溶水分(fēn)子或亲水物(wù)质。微乳液一般由4种组分(fēn)组成,即表面活性剂、助表面活性剂(一般為(wèi)脂肪醇)、有(yǒu)机溶剂(一般為(wèi)烷烃或环烷烃)和水。它是一种热力學(xué)稳定體(tǐ)系,可(kě)以合成大小(xiǎo)均匀、粒径在10-20nm的液體(tǐ)颗粒。

 

晶种生長(cháng)法:晶种生長(cháng)法是通过晶种合成反应制备金纳米颗粒,该法优点在于比一步法得到的颗粒粒径分(fēn)布窄,可(kě)以通过控制反应条件最终制备出粒径在50-110nm之间的金纳米球。同时,晶种生長(cháng)法因其合成过程简便、高产量、長(cháng)短径比可(kě)控及表面易于修饰等优点而成為(wèi)合成胶體(tǐ)金纳米棒最流行的方法。其基本原理(lǐ)是在反应溶液中加入一定量的金纳米颗粒晶种,在表面活性剂分(fēn)子的作用(yòng)下,晶种颗粒定向生長(cháng)為(wèi)一定長(cháng)径比的金纳米棒。

 

光化學(xué)还原法:光化學(xué)还原法是最早用(yòng)来制备金纳米棒的方法,在制备过程中,金酸与棒状的阳离子表面活性剂胶束结合在一起形成离子对,然后在紫外激发下電(diàn)子从金属离子转移到配體(tǐ)中,从而使金离子还原成金。

 

纳米金的表面PEG化:用(yòng)琉基聚乙二醇(PEG-SH)对金纳米球进行修饰,修饰过程為(wèi):100μL浓度為(wèi)5X 10-4mol/L的上述配體(tǐ)分(fēn)别加入到1ml金纳米球溶液中,再将其搅拌30S以充分(fēn)混合,然后将其放入4℃冰箱备用(yòng)。

纳米金的表征方法:

為(wèi)了全面而准确的表征纳米金的性质,通常使用(yòng)多(duō)种手段同时对纳米金进行分(fēn)析,常用(yòng)的表征方法有(yǒu):紫外可(kě)见光谱(Uv-vis)、红外光谱(FI-IR),扫描電(diàn)子显微镜(SEM)或投射電(diàn)子显微镜(      TEM)、電(diàn)动電(diàn)位或電(diàn)动電(diàn)势(Zeta電(diàn)位)、X射線(xiàn)衍射(XRD)、X射線(xiàn)光電(diàn)子能(néng)谱、毛细管電(diàn)泳(CE)等。

電(diàn)子显微镜(SEMTEM):SEMTEM是观察纳米金粒子的直观方法,可(kě)以清楚的观察到粒子形貌,大小(xiǎo)和分(fēn)散度情况。


紫外可(kě)见(Uv-vis:纳米金溶胶因其等离子共振作用(yòng),使得他(tā)在溶液中有(yǒu)特定的颜色。纳米金粒子表面包配體(tǐ)、历经大小(xiǎo)和粒子形状不同时,粒子所表现出来的等离子共振吸收是不一样的。金纳米粒子的等离子體(tǐ)共振分(fēn)為(wèi)横向伸缩振动和纵向伸缩振动,在金粒子以球形存在于溶液中时,重要表现出横向伸缩振动,Uv-vis吸收在520nm左右,当纳米金溶胶中以棒状,線(xiàn)装,三角片状或其它非球形是,粒子主要表现出纵向伸缩振动,最大吸收波長(cháng)在600nm-1400nm处不等,最大吸收波長(cháng)越大,棒状与線(xiàn)装粒子的長(cháng)径比越大,三角片的边厚比也越大,溶液表现出不同的颜色,如灰色、蓝色和深棕色等。

红外光谱(FI-IR):每种物(wù)质的分(fēn)子有(yǒu)其一定的分(fēn)子结构,有(yǒu)一定的能(néng)级图,从而产生的红外吸收光谱,从而带来了分(fēn)子能(néng)级图的信息。对红外光谱的分(fēn)子,可(kě)以了解表面配體(tǐ)与纳米金之间的相互作用(yòng)关系,对反应的机理(lǐ)及不同修饰剂对Au作用(yòng)的方式与力的大小(xiǎo)可(kě)以简单明了的分(fēn)析。



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